Manejo de muestras para inmunohistoquímica

En las muestras que requieren estudios de inmunohistoquímica es esencial seguir estrictamente las normas idóneas de fijación y procesado para evitar que el tejido se dañe y no pueda ser utilizado para estos estudios complementarios.

Actualmente es frecuente en la patología oncológica la realización de estudios complementarios de inmunohistoquímica (IHQ) y/o biología molecular (BM). Estos estudios se realizan con fines diagnósticos, pronósticos y de valor predictivo, para decidir conducta y tratamiento.

La fijación de los tejidos es una parte fundamental en el procesamiento de las muestras. Una mala fijación, en defecto o en exceso, no tiene vuelta atrás; el tejido quedará irremediablemente dañado, para fines de estos estudios complementarios (IHQ y/o BM).

Es de gran importancia que todo el personal involucrado conozca y aplique las siguientes normativas en el manejo  de muestras de biopsias para estudios de inmunohistoquímica:

  1. Colocar la muestra de biopsia en formol inmediatamente, máximo 15 minutos después de obtenerla.
  2. Colocar la muestra en un volumen de formol suficiente, al menos en una proporción de 1/10 (volumen muestra tisular/formol) o mayor.
  3. El formol se obtiene de una dilución de la solución de formaldehido al 37 % en agua o idealmente en buffer fosfato, al 10 %, es decir, una parte de formaldehido en nueve partes de agua o buffer.
  4. El tiempo de fijación no debe ser menor de 6 horas ni mayor de 48 horas.
  5. Una muestra pequeña incisional o de aguja gruesa (BAG, trucut) que sobrepase las 72 h de fijación tendrá sobre fijación y es muy posible que los estudios de IHQ o BM resulten falsos negativos para todos los marcadores.
  6. En el otro extremo, las muestras de piezas quirúrgicas como, por ejemplo, de mastectomías, es importante que lleguen a un laboratorio de patología cuanto antes, mejor el mismo día. Y en el laboratorio, es fundamental que la pieza sea rebanada, a fin de garantizar la penetración del formol en el tumor y evitar su degradación (autolisis).
  7. Es igualmente importante que en los laboratorios de anatomía patológica estén al tanto de estos procedimientos y utilicen, además, productos de calidad adecuada y disoluciones correctas.
  8. Es recomendable que el patólogo, al estudiar y diagnosticar un caso, seleccione la lámina (sección histológica) más adecuada para estudios de IHQ/BM; que tengan mayor cantidad de neoplasia y, de una vez, se separe el bloque correspondiente para ser entregado al paciente.
  9. En algunos laboratorios tienen como norma entregar todos los bloques del caso al paciente, a veces hasta 20 o más bloques. Esto representa un retraso significativo, ya que en el laboratorio de IHQ/BM, habrá que hacer láminas con HE, a fin de seleccionar el bloque más adecuado, ocasionando gastos adicionales y demora en el resultado del estudio.
  10. Es muy lamentable que después de un procedimiento quirúrgico de envergadura o de toma de biopsia con aguja gruesa, los estudios de diagnóstico, pronóstico y predictivos resulten inadecuados por fallas en la fijación y/o procesamiento de la muestra.

El seguimiento de estas simples recomendaciones redundará en un enorme beneficio para el paciente, fin, objetivo y razón de ser de nuestra profesión.

Dr. Julio Castro, Dr. Aldo Reigosa, del equipo médico de Funcamama

 

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