En las muestras que requieren estudios de inmunohistoquímica es esencial seguir estrictamente las normas idóneas de fijación y procesado para evitar que el tejido se dañe y no pueda ser utilizado para estos estudios complementarios.
Actualmente es frecuente en la patología oncológica la realización de estudios complementarios de inmunohistoquímica (IHQ) y/o biología molecular (BM). Estos estudios se realizan con fines diagnósticos, pronósticos y de valor predictivo, para decidir conducta y tratamiento.
La fijación de los tejidos es una parte fundamental en el procesamiento de las muestras. Una mala fijación, en defecto o en exceso, no tiene vuelta atrás; el tejido quedará irremediablemente dañado, para fines de estos estudios complementarios (IHQ y/o BM).
Es de gran importancia que todo el personal involucrado conozca y aplique las siguientes normativas en el manejo de muestras de biopsias para estudios de inmunohistoquímica:
- Colocar la muestra de biopsia en formol inmediatamente, máximo 15 minutos después de obtenerla.
- Colocar la muestra en un volumen de formol suficiente, al menos en una proporción de 1/10 (volumen muestra tisular/formol) o mayor.
- El formol se obtiene de una dilución de la solución de formaldehido al 37 % en agua o idealmente en buffer fosfato, al 10 %, es decir, una parte de formaldehido en nueve partes de agua o buffer.
- El tiempo de fijación no debe ser menor de 6 horas ni mayor de 48 horas.
- Una muestra pequeña incisional o de aguja gruesa (BAG, trucut) que sobrepase las 72 h de fijación tendrá sobre fijación y es muy posible que los estudios de IHQ o BM resulten falsos negativos para todos los marcadores.
- En el otro extremo, las muestras de piezas quirúrgicas como, por ejemplo, de mastectomías, es importante que lleguen a un laboratorio de patología cuanto antes, mejor el mismo día. Y en el laboratorio, es fundamental que la pieza sea rebanada, a fin de garantizar la penetración del formol en el tumor y evitar su degradación (autolisis).
- Es igualmente importante que en los laboratorios de anatomía patológica estén al tanto de estos procedimientos y utilicen, además, productos de calidad adecuada y disoluciones correctas.
- Es recomendable que el patólogo, al estudiar y diagnosticar un caso, seleccione la lámina (sección histológica) más adecuada para estudios de IHQ/BM; que tengan mayor cantidad de neoplasia y, de una vez, se separe el bloque correspondiente para ser entregado al paciente.
- En algunos laboratorios tienen como norma entregar todos los bloques del caso al paciente, a veces hasta 20 o más bloques. Esto representa un retraso significativo, ya que en el laboratorio de IHQ/BM, habrá que hacer láminas con HE, a fin de seleccionar el bloque más adecuado, ocasionando gastos adicionales y demora en el resultado del estudio.
- Es muy lamentable que después de un procedimiento quirúrgico de envergadura o de toma de biopsia con aguja gruesa, los estudios de diagnóstico, pronóstico y predictivos resulten inadecuados por fallas en la fijación y/o procesamiento de la muestra.
El seguimiento de estas simples recomendaciones redundará en un enorme beneficio para el paciente, fin, objetivo y razón de ser de nuestra profesión.
Dr. Julio Castro, Dr. Aldo Reigosa, del equipo médico de Funcamama
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